PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)裝修各功能間劃分與設(shè)備配置

對(duì)實(shí)驗(yàn)室有一定了解的人堅(jiān)信，我們都知道，PCR實(shí)驗(yàn)室最重要的是每個(gè)功能間的旋風(fēng)壓差操作，特別是材料區(qū)域的氣體不能相互勾結(jié)，以防止交叉污染、檢查數(shù)據(jù)信息重疊無效等。（功能間清潔度等級(jí)規(guī)定可準(zhǔn)確定位準(zhǔn)凈化室規(guī)范和10萬級(jí)標(biāo)準(zhǔn)）；因此，根據(jù)PCR操作步驟方向，實(shí)驗(yàn)試劑提前準(zhǔn)備，規(guī)范制備，增加區(qū)域和材料分析區(qū)域。相對(duì)壓差還需要從實(shí)驗(yàn)試劑提前準(zhǔn)備到材料分析方向從高到低的整個(gè)過程。然而，在具體的應(yīng)用調(diào)節(jié)過程中，人們會(huì)遇到緩存的標(biāo)準(zhǔn)氣壓難以調(diào)節(jié)到額定值的問題。如果增加-5~-10pa在物質(zhì)緩沖區(qū)，在調(diào)節(jié)過程中會(huì)出現(xiàn)壓差不平衡。例如，如果將清潔通道注入緩存方向，緩存是一個(gè)小的負(fù)壓室，如果緩存處于被動(dòng)注入負(fù)壓室，則應(yīng)變力為正壓，然后緩沖室排氣系統(tǒng)超過排氣量，即排氣設(shè)置為關(guān)閉后，負(fù)壓的額定值主要可以完成，因此不可能關(guān)閉排氣以保持負(fù)壓

事實(shí)上，我們只需要掌握PCR的重要特點(diǎn)，也可以采取其他方法來完成旋風(fēng)合理化操作，如PCR緩沖室作為第二個(gè)緩沖間（房間和緩沖室是雙層保護(hù)天然屏障，清潔通道開放是第一個(gè)天然屏障），因此緩沖室設(shè)置為相對(duì)或積極壓力值必須符合應(yīng)用規(guī)范。

一、PCR實(shí)驗(yàn)室關(guān)鍵機(jī)械設(shè)備。

1.實(shí)驗(yàn)試劑提前準(zhǔn)備區(qū):
關(guān)鍵是實(shí)驗(yàn)試劑的制備。散裝和主要反射混合物的制備。實(shí)驗(yàn)試劑和用于制造試驗(yàn)產(chǎn)品的材料應(yīng)立即運(yùn)輸?shù)皆搮^(qū)域，而不是通過其他區(qū)域。實(shí)驗(yàn)試劑原料必須儲(chǔ)存在該區(qū)域，并在景區(qū)制成所需的實(shí)驗(yàn)試劑。該區(qū)域的關(guān)鍵設(shè)施包括天平秤、冰箱、離心脫水器、樣品加工器、攪拌器等。對(duì)于氣旋工作壓力的操作，所在區(qū)域沒有嚴(yán)格的規(guī)定。

2.試品制備區(qū):
關(guān)鍵是進(jìn)行試品的儲(chǔ)存。DNA。DNA獲取。儲(chǔ)存和添加到反射管和測(cè)量DNA的生成。該地區(qū)的關(guān)鍵設(shè)施包括冰箱、超凈工作臺(tái)、離心脫水機(jī)、樣品添加器、攪拌器、恒溫水浴罐等。該區(qū)域的滲透壓力規(guī)定為:相鄰區(qū)域的相對(duì)壓力為正壓，以防止從相鄰區(qū)域進(jìn)入城市的大氣氣溶膠污染。

3.增加區(qū)域:
關(guān)鍵是增加DNA。此外，該區(qū)域還可以添加制備的DNA模板(來自試驗(yàn)制備區(qū)域)和主反射混合物(來自實(shí)驗(yàn)試劑的預(yù)先準(zhǔn)備區(qū)域)來制造反射混合物。該區(qū)域的關(guān)鍵設(shè)施包括:增加儀器樣品添加器和消毒車。

該區(qū)域的滲透壓力規(guī)定為：相鄰區(qū)域的相對(duì)性為負(fù)壓，以防止大氣氣溶膠從該區(qū)域泄漏。

4.增加材料分析區(qū)域:
增加材料的測(cè)量。該區(qū)域的關(guān)鍵設(shè)施包括電泳儀器、微波加熱馬沸爐、加樣器、凈化工作臺(tái)、凝膠成像數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)等。

所在區(qū)域的滲透壓力需要：相對(duì)性為相鄰區(qū)域的負(fù)壓，以防止增加的物質(zhì)從所在區(qū)域擴(kuò)散到其他區(qū)域。
 

二、PCR實(shí)驗(yàn)室各分區(qū)的功能

PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)各分區(qū)介紹
1、試劑準(zhǔn)備區(qū)（1區(qū)）的主要操作是儲(chǔ)存試劑的制備、試劑的包裝和擴(kuò)展反應(yīng)混合物的制備。用于標(biāo)本生產(chǎn)的試劑和材料應(yīng)直接運(yùn)輸?shù)皆搮^(qū)域，不得通過其他區(qū)域。試劑原料必須儲(chǔ)存在該區(qū)域，并在該區(qū)域制備所需的儲(chǔ)存試劑。房間面積應(yīng)控制在15㎡~20㎡。該區(qū)域的壓力梯度要求為：相對(duì)正壓，以防止含有核酸氣溶膠的外部空氣進(jìn)入并造成污染。
2、標(biāo)本制備區(qū)（2區(qū)）的主要操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸（RNA、DNA）提取、儲(chǔ)存和添加到擴(kuò)展反應(yīng)管和測(cè)量RNA時(shí)CDNA的合成。標(biāo)本制備區(qū)域應(yīng)在25㎡~30㎡之間。該區(qū)域的壓力梯度要求為：相對(duì)于相鄰區(qū)域的正壓，以避免從相鄰區(qū)域進(jìn)入該區(qū)域的氣溶膠污染。此外，由于氣溶膠在樣品操作中可能會(huì)造成污染，因此應(yīng)避免在該區(qū)域內(nèi)不必要的行走。
3、擴(kuò)展反應(yīng)混合物制備和擴(kuò)展區(qū)（3區(qū)）的主要操作是DNA或CDNA擴(kuò)展。此外，還可以在該區(qū)域添加已制備的DNA模板和合成的CDNA（樣品制備區(qū)），以及主反應(yīng)混合物（試劑儲(chǔ)存和制備區(qū)）制備的反應(yīng)混合物。擴(kuò)展室主要配備PCR實(shí)驗(yàn)室的核心儀器PCR儀器。在實(shí)驗(yàn)室施工過程中，PCR儀器應(yīng)配備專用UPS電源，以確保其正常運(yùn)行。該區(qū)域的面積控制在15㎡~20㎡之間。該區(qū)域的壓力梯度要求為：相對(duì)于相鄰區(qū)域的負(fù)壓，以避免氣溶膠從該區(qū)域泄漏。為避免氣溶膠造成的污染，應(yīng)盡量減少該區(qū)域內(nèi)不必要的行走。個(gè)別操作，如樣品，應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。建議使用≥10Pa壓差，以便于控制。
4、擴(kuò)展產(chǎn)品分析區(qū)（4區(qū)）的主要操作是擴(kuò)展片段的測(cè)量。該區(qū)域是擴(kuò)大產(chǎn)品污染的主要來源，因此該區(qū)域的壓力梯度要求為：相對(duì)于相鄰區(qū)域的負(fù)壓，以避免擴(kuò)大產(chǎn)品從該區(qū)域擴(kuò)散到其他區(qū)域。室內(nèi)配備通風(fēng)柜，確保室內(nèi)相對(duì)負(fù)壓，空氣從室外流入室內(nèi)。該區(qū)域控制在15m2~20m2。

 

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