微生物無菌實(shí)驗(yàn)室建設(shè)——萬融實(shí)驗(yàn)室裝修設(shè)計(jì)
基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)又稱PCR實(shí)驗(yàn)室,其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增添,PCR是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)的通例方式,普遍應(yīng)用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域。例如:艾滋病檢測、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的檢測和診斷,DNA指紋、個(gè)體識別、親子判定及法醫(yī)物證、動(dòng)植物檢疫,動(dòng)物及其衍生產(chǎn)物檢測,動(dòng)物飼料、化妝品、食品衛(wèi)生檢測,轉(zhuǎn)基因作物與轉(zhuǎn)基因微生物檢測等。

一、pcr實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)
PCR實(shí)驗(yàn)室原則上為試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物剖析區(qū)四個(gè)單獨(dú)的事情區(qū)域并設(shè)有專用走廊,各事情區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間,事情區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。差別功效的事情區(qū)應(yīng)是離開自力的,各事情區(qū)有顯著的標(biāo)志,不能直通,若是慎密相連,需安裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū),后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū),擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)酷離開。實(shí)驗(yàn)質(zhì)料、試劑、記錄紙、筆、清潔質(zhì)料等,只能從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū),即從試劑準(zhǔn)備區(qū)→樣品制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物剖析區(qū),不得逆向流動(dòng)。實(shí)驗(yàn)室的氣流也應(yīng)從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū),不得逆向流動(dòng)。各事情區(qū)頂部應(yīng)安裝紫外燈,紫外燈的波長為254nm,每20㎡一支40W的紫外燈。

二、實(shí)驗(yàn)室各區(qū)功效及主要裝備
1、試劑準(zhǔn)備區(qū):主要舉行試劑的制備、分裝和主反映混合液的制備。試劑和用于樣品制作的質(zhì)料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū),不得經(jīng)由其它區(qū)域。試劑原質(zhì)料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。本區(qū)主要裝備有天平、冰箱、離心機(jī)、加樣器、振蕩器等。對于氣流壓力的控制,本區(qū)并沒有嚴(yán)酷的要求。
2、樣品制備區(qū):主要舉行樣品的保留、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反映管和測定DNA的合成。本區(qū)主要裝備有冰箱、生物安全柜、離心機(jī)、加樣器、振蕩器、恒溫水浴等。
本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于相近區(qū)域?yàn)檎龎海灾浦箯南嘟鼌^(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。
3、擴(kuò)增區(qū):主要舉行DNA擴(kuò)增。此外,已制備的DNA模板 (來自樣品制備區(qū))的加入和主反映混合液(來自試劑準(zhǔn)備區(qū))制備成反映混合液等也可在本區(qū)內(nèi)舉行。本區(qū)主要裝備有:擴(kuò)增儀、冰箱、離心機(jī)、加樣器等。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于相近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,以制止氣溶膠從本區(qū)漏出。
4、擴(kuò)增產(chǎn)物剖析區(qū):擴(kuò)增產(chǎn)物的測定。本區(qū)主要裝備有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器和水浴箱等。本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于相近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,以制止擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域。

三、PCR實(shí)驗(yàn)室透風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制
各區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的珍愛屏障,制止實(shí)驗(yàn)之間的相互滋擾,防止氣溶膠擴(kuò)散對實(shí)驗(yàn)歷程造成污染。PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)酷的凈化要求,然則為制止各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域交織污染的可能性,宜接納全送全排的氣流組織形式,嚴(yán)酷控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。

四、PCR實(shí)驗(yàn)室裝飾
實(shí)驗(yàn)室圍護(hù)結(jié)構(gòu)應(yīng)牢靠、氣密性好。所有陰陽角宜接納圓弧過渡,墻體內(nèi)壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒。地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹脂自流坪,質(zhì)料應(yīng)知足無裂縫、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
五、PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)
1、幾個(gè)區(qū)域的巨細(xì)設(shè)置情形,試劑準(zhǔn)備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物剖析區(qū),空間可以相對小一些,樣品制備區(qū)要放置生物平安柜和低溫冰箱,空間應(yīng)大一些。
2、試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)設(shè)緊要洗眼器,以保證操作職員的平安。
3、PCR實(shí)驗(yàn)室沒有嚴(yán)酷的凈化要求,可以憑據(jù)用戶的使用情形和資金的投入選擇。
